肌肉組織因其纖維含量高、細胞間連接緊密的性質特點，一直是單細胞懸液制備中的難點樣本。與肝、脾等軟組織相比，肌肉組織中的肌纖維被致密的結締組織層層包裹，傳統的手工消化方式難以破壞這些結構，往往會存在細胞解離不充分、細胞活力低、重復性差等問題，嚴重影響了下游的單細胞測序、流式分析等實驗的數據質量。
實驗目的：應用上海凈信JX-DLDXB-4單細胞懸液制備儀處理小鼠肌肉組織。該案例由終端客戶在常規實驗條件下完成，旨在為從事肌肉組織單細胞研究的各位老師提供一份可重復的實驗參考方案。
實驗儀器：單細胞懸液制備儀JX-DLDXB-4
樣品類型：小鼠肌肉組織
樣品用量：約200mg
消化酶用量：1.5mL
實驗程序：肌肉程序，運行時間25分鐘
后續實驗：流式細胞術檢測及表面抗原分析
此次實驗所用的消化酶為凈信酶離者系列配套的組織單細胞解離酶試劑盒，針對肌肉組織優化了配比，能夠高效降解細胞外基質中的膠原蛋白和彈性蛋白，配合儀器的機械切割作用實現“雙效解離”。
小鼠肌肉組織單細胞懸液制備的實驗操作流程：
1.儀器預熱：開啟JX-DLDXB-4單細胞懸液制備儀，選擇對應程序。
2.組織清洗與處理：取新鮮離體的肌肉組織樣品，用預冷的PBS（含1%雙抗）清洗2~3次，去除血液殘留和組織碎片。用眼科剪將組織充分剪碎至1~2mm3大小，這是提高解離效率的關鍵步驟——組織塊越小，消化酶與組織的接觸面積越大，酶解反應越充分、越均勻。
3.加酶消化：將剪碎的組織轉移至儀器配套離心管中，加入2mL配套消化酶。將離心管安裝到儀器適配器上，安裝加熱套以確保消化溫度恒定。啟動肌肉程序，儀器開始運行。程序運行過程中，轉刀雙向旋轉產生機械剪切力，配合酶的化學消化作用，同步破壞組織結構和細胞外基質。
4.終止消化：程序運行過程中，可暫停儀器查看消化進度。用移液槍吹打觀察組織狀態：若組織已基本消化為絮狀或無明顯肉眼可見組織塊，則可停止運行。立即加入等體積的終止液（按1:1比例終止消化反應），輕柔混勻，避免過度消化導致細胞膜損傷和活力下降。
5.過濾與重懸：使用去碎片試劑進行碎片去除處理后，將細胞懸液通過70μm細胞篩網過濾，去除未完全消化的組織碎片和結締組織殘余。收集濾液，400g離心5分鐘，棄上清，用適量PBS或含BSA的緩沖液重懸細胞沉淀，調整至所需細胞濃度。
實驗結果：終端客戶對儀器及實驗效果表示滿意，認為該方案相較于傳統手工消化在操作便捷性和結果穩定性上均有顯著提升。客戶反饋，過去手工消化肌肉組織通常需要60~90分鐘，且批次間差異明顯；使用JX-DLDXB-4后，整個消化流程標準化，實驗重復性大幅提高。
實驗結論：使用JX-DLDXB-4單細胞懸液制備儀的肌肉程序，僅用25分鐘即可完成約200mg小鼠肌肉組織的充分解離。消化后細胞懸液狀態良好，可直接用于流式細胞術檢測及表面抗原分析等后續實驗，終端客戶對儀器及實驗效果表示滿意。
與傳統手工消化方法對比：
肌肉組織的單細胞懸液制備長期以來依賴手工消化，操作者需要反復用移液槍吹打、定時觀察消化狀態，整個過程耗時長且高度依賴個人經驗。以下對比可直觀展示JX-DLDXB-4轉刀款的優勢：
實驗注意事項：
◆ 安裝加熱套，確保消化溫度恒定。
◆ 組織需充分剪碎后再加入消化酶，以提高解離效率。
◆ 消化完成后加入終止液時，建議按1:1比例終止，避免過度消化損傷細胞。
◆ 后續進行流式實驗時，建議實驗間隔時間控制在4小時以內，以保證細胞狀態。
單細胞懸液制備儀的產品亮點：
◆ 25分鐘快速解離：預設程序一鍵啟動
◆ 磁珠剪切技術：溫和高效無死角
◆ 高重復性：標準化程序輸出
◆ 細胞活力好：可直接用于下游實驗安裝加熱套，確保消化溫度恒定。
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